论著
李娟, 韦旗, 李景然, 张影, 唐志霞, 邹林兵, 洪名云
目的 探讨基于二代测序(next-generation sequencing,NGS)技术的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)连锁分析在常染色体显性遗传性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)家系新突变的胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)中的应用价值。方法 选取 1 个 ADPKD 家系,采用全外显子组测序、核型分析来检测该家系的致病性突变,为阻断该病的遗传效应,体外授精后行囊胚培养,对形成的囊胚进行滋养层细胞活检,利用多次退火环状循环扩增技术(multiple annealing and looping-based amplification cycles,MALBAC)对活检细胞进行全基因组扩增(whole genome amplification,WGA),通过 Sanger 测序结合基于NGS的SNP连锁分析进行验证和判断是否携带突变基因,采用拷贝数变异(Copy number variation,CNV)分析筛查染色体的非整倍性。中孕期产前诊断验证PGT结果是否准确。 结果 发现先证者PKD1 基因存在一个新的 c.2098-2A>G 突变。对卵胞浆内单精子注射(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后形成的3个囊胚进行活检,其中有1个为未携带突变的整倍体,将此枚整倍体胚胎进行冻融胚胎移植(FET)后获得临床妊娠,中孕期产前诊断证实胎儿未携带PKD1基因 c.2098-2A>G 杂合突变。结论 研究是首次针对PKD1基因c.2098-2A>G 突变的PGT 报道,拓展了PKD1基因的突变谱,为ADPKD的分子诊断和遗传咨询提供了新的思路。基于NGS的SNP连锁分析进行PGT结合侵入性产前诊断是一种阻断ADPKD垂直传递的有效的方法,并可预防其他单基因遗传病。