Abstract:

 Objective    To observe the osteogenesis of periodontal ligament cells （PDLCs） with human osteoprotegerin（hOPG） transfection in vivo and vitro. Methods    Ad5-hOPG-EGFP was constructed in vitro and transfected into canine PDLCs. Von Kossa staining， Real-Time PCR， ELISA and experiment in nude mice vivo were used to assess the osteogenic indices of hOPG-hPDLCs. Results    Morphologic and histological study demonstrated that hOPG-hPDLCs formed much more and larger mineralized nodules， and expressed higher level of alkaline phosphates（ALP）、osteocalcin（OC） and bone sialoprotein（BSP） （P < 0.05）. RANKL/OPG ratio declined most in hOPG-PDLCs. Transfected collagen membrane group also reflected the better osteogenic ability in nude mice vivo experiment. Conclusion    OPG gene transfection can promote osteogenic ability of PDLCs.

Key words: periodontal ligament cells, osteoprotegerin, osteogenic ability

摘要：

目的    观察重组腺病毒载体 Ad5-hOPG-EGFP 转染 的Beagle 犬牙周膜细胞（ PDLCs）体内和体外的骨化能力。方法    将体外构建的携带人骨保护素（human osteoprotegerin，hOPG）基因的腺病毒载体Ad5-hOPG-EGFP转染Beagle犬PDLCs，通过体外Von Kossa染色实验、实时荧光定量PCR检测成骨指标的表达情况、酶联免疫检测RANKL/OPG的值及裸鼠体内胶原膜成骨实验比较转染组和对照组的成骨能力。结果    组织学和形态学结果显示，转染了重组腺病毒Ad5-hOPG-EGFP的Beagle犬PDLCs形成的矿化结节数目多且体积大、深染。转染组中犬碱性磷酸酶（alkaline phosphates，ALP）、骨钙素（osteocalcin，OC）、骨涎蛋白（bone sialoprotein，BSP）基因相对表达水平均高于空载体组和空白对照组（P＜0.05）。转染组中犬RANKL/OPG的值下降趋势最为明显。裸鼠体内实验中转染组胶原膜也体现出较好的成骨能力。结论    重组腺病毒介导的hOPG基因可以促进PDLCs成骨。

关键词: 牙周膜细胞, 骨保护素, 成骨能力