摘要:
目的 观察重组腺病毒载体 Ad5-hOPG-EGFP 转染 的Beagle 犬牙周膜细胞( PDLCs)体内和体外的骨化能力。方法 将体外构建的携带人骨保护素(human osteoprotegerin,hOPG)基因的腺病毒载体Ad5-hOPG-EGFP转染Beagle犬PDLCs,通过体外Von Kossa染色实验、实时荧光定量PCR检测成骨指标的表达情况、酶联免疫检测RANKL/OPG的值及裸鼠体内胶原膜成骨实验比较转染组和对照组的成骨能力。结果 组织学和形态学结果显示,转染了重组腺病毒Ad5-hOPG-EGFP的Beagle犬PDLCs形成的矿化结节数目多且体积大、深染。转染组中犬碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)基因相对表达水平均高于空载体组和空白对照组(P<0.05)。转染组中犬RANKL/OPG的值下降趋势最为明显。裸鼠体内实验中转染组胶原膜也体现出较好的成骨能力。结论 重组腺病毒介导的hOPG基因可以促进PDLCs成骨。